凝膠成像系統(tǒng)是一種集凝膠觀(guān)察、拍攝、分析于一體的先進(jìn)設(shè)備,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物工程和生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。該系統(tǒng)利用數(shù)碼相機(jī)或高分辨率CCD拍攝凝膠電泳后的圖像,通過(guò)計(jì)算機(jī)分析軟件實(shí)現(xiàn)樣品的定性和定量分析。隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)代凝膠成像系統(tǒng)已經(jīng)能夠覆蓋紫外激發(fā)、化學(xué)發(fā)光、多色熒光等多種成像模式,極大地拓寬了其應(yīng)用范圍。
一、原理
凝膠成像系統(tǒng)的核心原理基于樣品對(duì)光的吸收差異。光源發(fā)出的光線(xiàn)照射到樣品上,不同樣品因成分和濃度的不同,對(duì)光的吸收量存在差異。通過(guò)拍攝這些差異形成的圖像,并利用軟件進(jìn)行分析,可以得到樣品的光密度信息,進(jìn)而推算出樣品的濃度或質(zhì)量。定性分析則依賴(lài)于樣品在電泳凝膠或其他載體上的遷移率差異,通過(guò)比較未知樣品與標(biāo)準(zhǔn)品在圖譜中的位置,確定未知樣品的成分和性質(zhì)。
二、使用方法
開(kāi)機(jī)與預(yù)冷:首先開(kāi)啟CCD電源進(jìn)行預(yù)冷,約15分鐘后使用效果更佳。隨后依次打開(kāi)電腦、暗箱電源,并運(yùn)行分析軟件(如Image Lab)。
樣品準(zhǔn)備與放置:將凝膠樣品放置在紫外透射儀的中心位置,確保照明燈自動(dòng)打開(kāi)后,樣品能均勻受光。
參數(shù)設(shè)置與成像:在軟件中設(shè)置曝光時(shí)間、增益等參數(shù),點(diǎn)擊運(yùn)行實(shí)驗(yàn)協(xié)議開(kāi)始自動(dòng)照相。成像結(jié)束后,從多張圖片中選擇最佳圖像進(jìn)行后續(xù)處理。
圖像分析與保存:利用軟件中的圖像處理菜單進(jìn)行亮度調(diào)整、優(yōu)化等處理,降低圖像本底噪聲,獲得清晰凝膠圖片。最后,將處理好的圖像保存或打印輸出。
三、常見(jiàn)故障及維修方法
顯示屏幕故障:如黑屏、顯示異常等,首先檢查電源連接是否正常。若電源正常,則可能是屏幕故障,需更換屏幕。
光源故障:光源不亮或亮度不足時(shí),檢查燈管或電源是否損壞,必要時(shí)進(jìn)行更換。
攝像頭故障:無(wú)法拍攝或圖像不清晰,可能是鏡頭污染或老化。使用干凈紙巾擦拭鏡頭,如無(wú)效則需更換攝像頭。
電路故障:如連接不上電腦或圖像無(wú)法傳輸,檢查接口是否松動(dòng),線(xiàn)路是否老化。確認(rèn)接口緊密連接后,若問(wèn)題依舊,需更換連接線(xiàn)路。
參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤:檢查參數(shù)設(shè)置是否正確,如圖像亮度和對(duì)比度設(shè)置不當(dāng),會(huì)影響成像效果。根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。
圖像模糊或不清晰:調(diào)整對(duì)焦環(huán)以獲得清晰圖像,如鏡頭污染則進(jìn)行清潔。
圖像色彩失真:檢查白平衡設(shè)置是否正確,必要時(shí)進(jìn)行調(diào)整以糾正圖像色彩。
四、維護(hù)與保養(yǎng)
定期更換燈管:由于燈管隨使用時(shí)間增加會(huì)老化或損壞,建議定期更換以保證成像效果。
定期清潔:使用清潔布和清潔液對(duì)設(shè)備進(jìn)行清潔,避免鏡頭模糊和其他故障發(fā)生。注意避免清洗劑流入設(shè)備內(nèi)部。
正確存放:長(zhǎng)時(shí)間不使用設(shè)備時(shí),注意存放環(huán)境避免陽(yáng)光直射、高溫和潮濕。
定期校準(zhǔn):成像效果不理想時(shí),可能需要進(jìn)行設(shè)備校準(zhǔn)以保證準(zhǔn)確性。
綜上所述,凝膠成像系統(tǒng)作為分子生物學(xué)研究的重要工具,其原理基于樣品對(duì)光的吸收差異,通過(guò)精確的操作和維護(hù)可確保設(shè)備的正常運(yùn)行和成像效果。在實(shí)際應(yīng)用中,及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決故障對(duì)于保障實(shí)驗(yàn)分析的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。
五、容濟(jì)機(jī)電維修過(guò)的凝膠成像系統(tǒng)品牌和型號(hào)
1. Bio-Rad
(1)ChemiDoc系列:ChemiDoc MP,ChemiDoc XRS+
(2)GelDoc系列:GelDoc Go,GelDoc EZ
2.GE Healthcare (現(xiàn)Cytiva)
(1)Amersham Imager系列:Amersham Imager 600,Amersham Imager 680
(2)Typhoon系列:Typhoon FLA 9500,Typhoon FLA 7000
3.Syngene
(1)G系列:GChemi XRQ,GChemi XX6
(2)GeneSys系列:GeneSys
4.Thermo Fisher Scientific
(1)iBright Imaging Systems系列:iBright FL1000,iBright CL1500
(2)myECL Imager: 通用成像系統(tǒng)
5.Azure Biosystems
(1)Azure C系列:Azure C200,Azure C300,Azure C600
(2)Azure Sapphire: 多功能生物成像系統(tǒng)
6.LI-COR Biosciences
(1)Odyssey系列:Odyssey CLx,Odyssey Fc
(2)Pearl Trilogy: 定量成像系統(tǒng)
7.Analytik Jena
(1)UVP系列:UVP BioDoc-It2,UVP GelDoc-It2
(2)ChemStudio系列:ChemStudio,ChemStudio Touch
8.Vilber Lourmat
(1)Fusion FX系列:Fusion FX7,F(xiàn)usion FX6,
(3)Quantum系列:Quantum ST4,Quantum ST5
9.Eppendorf
(1)Eppendorf BioSpectrometer: 吸光度和熒光檢測(cè)系統(tǒng)
(2)Eppendorf Gel Imager: 凝膠成像系統(tǒng)
10.UVP (part of Analytik Jena)
(1)BioSpectrum Imaging System: 通用成像系統(tǒng)
(2)ChemiDoc-It2: 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)
11.ProteinSimple (part of Bio-Techne)
(1)FluorChem系列:FluorChem E,F(xiàn)luorChem R
(2)AlphaImager系列:AlphaImager HP,AlphaImager Mini
12.Gel Company
(1)OmniDOC系列:OmniDOC,OmniDOC MP
13.Uvitec
(1)UviLux系列:UviLux
(2)Alliance Q9 Advanced: 高靈敏度成像系統(tǒng)
14.Cleaver Scientific
(1)MicroDOC系列:MicroDOC Basic,MicroDOC Pro
(2)MultiDOC系列:MultiDOC-It2
15. Bio-Techne
(1)FluorChem系列:FluorChem M,F(xiàn)luorChem Q
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